(RSK) - serol. reacție utilizată pentru determinarea cantitativă a Abs și Ags fixatori de complement. Principiul RSC este că un complex imun specific absoarbe complet sau parțial C adăugat în sistem C este luat ca un indicator cantitativ de legare sistemul hemolitic modelul de hemoliză indică absența complexului imun în sistemul de diagnostic (RSC negativ),întârzierea hemolizei - datorită prezenței unui complex imun (RSC pozitiv).În RSK folosesc: 1) încălzit la 57 ° C timp de 30 de minute. s-ku, trebuie să fie proaspăt, fără particule în suspensie, citotoxine, C. Experimentul ia de obicei mai mulți multipli a 2 diluții de s-ki, în funcție de titrul diagnostic al CSC pentru boala suspectată; 2) diagnosticum de vânzare sau special pregătit pentru RSK; 3) C în doza de lucru, marginile la titrarea cu Ag este egală cu titrul C, iar la titrarea fără Ag - mai mare decât titrul C cu 20 - 25%; 4) eritrocitele de oaie se spală de mai multe ori cu ser fiziologic și se prepară o suspensie 3%; 5) acidul hemolitic este diluat de 3 ori mai puțin decât titrul indicat pe etichetă. Toate cele 5 componente sunt luate în același volum (0,5 ml sau 0,25 ml). Cercetarea este introdusă în sistemul experimental (diagnostic). s-ku, diagnosticum, S. Pregătiți controale: s-ki - s-ku, S și ser fiziologic (în loc de Ag); diagnosticum - diagnosticum, S și ser fiziologic (în loc de s-ki); C-C și volum dublu de soluție salină; evident pozitiv - sistem imunitar standard, Ag, C; evident negativ - normal s-ka, Ag, C. Eprubetele se scutură și se pun într-un termostat la 37 ° C timp de 45 de minute. În același timp, pregătiți un sistem hemolitic amestecând volume egale dintr-o suspensie 3% de eritrocite de oaie și sistem hemolitic și incubați-l într-un termostat pentru același timp. După sensibilizare, se adaugă un volum dublu de sistem hemolitic (1 ml sau 0,5 ml) în toate tuburile de testare și control. Toate tuburile sunt ținute într-un termostat la 37°C până când apare hemoliza completă în tuburile de control (aproximativ 30 - 40 de minute). Cu metoda cantitativă de stadializare a reacției, ei găsesc o diluție în care există o întârziere a hemolizei de cel puțin 2+ (La titru examinat) și o compară cu titrul diagnostic al bolii recunoscute. O metodă semi-cantitativă cu o diluție a medicamentului (de obicei 1:5) face posibilă determinarea gradului de întârziere a hemolizei cu 4+, 3+, 2+ și, pe baza acesteia, evaluarea intensității reacției. Rezultate mai precise sunt obținute prin găsirea titrului pe baza nu pe 100%, ci pe 50% hemoliză (vezi. Definiția complementului). A fost propusă o variantă de formulare cantitativă a RSC, în care se iau o diluție a medicamentului, dar mai multe doze de C (1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4). Toate celelalte componente sunt utilizate în aceleași cantități. Atunci când evaluează, ei țin cont de faptul că ce mai multe doze C conectează cercetarea. s-ka, cu atât mai mult At are.

(Sursa: Dicționarul de termeni de microbiologie)

Vedeți ce este „reacția de fixare a complementului” în alte dicționare:

reacție de fixare a complementului- Metoda de laborator RSK. [Glosar englez-rus de termeni de bază în vaccinologie și imunizare. Organizația Mondială a Sănătății, 2009] Subiecte vaccinologie, imunizare Sinonime ale testului de fixare a complementului RSC EN Testul CFTCF... Ghidul tehnic al traducătorului

REACȚIA DE FIXARE COMPLEMENTĂ- reacția de fixare a complementului, RSK, reacția Bordet-Zhangu [numită după belgiana. bacteriologi J. Bordet și O. Gengou, 1901], o reacție serologică foarte specifică și foarte sensibilă bazată pe proprietatea complexului... ... Dicționar enciclopedic veterinar

I Reacția de fixare a complementului este o reacție serologică utilizată pentru determinarea unui antigen sau anticorp, pe baza aprecierii consumului (fixării) de complement de către complexele antigen-anticorp, vezi Metode de cercetare imunologică. II...... Enciclopedie medicală

reacție de fixare a complementului

reacție de fixare a complementului- (RSK), o reacție serologică foarte sensibilă și specifică utilizată pentru diagnosticarea multor boli infecțioase și invazive ale animalelor. Constă din două faze succesive. În prima fază, antigenul este amestecat cu serul de testat și... ... Agricultură. Dicționar enciclopedic mare

- (RSK; sinonim: reacția Bordet Zhangu, reacția de respingere a complementului depășită, reacția de fixare a alexinei depășită) o metodă de cercetare serologică bazată pe capacitatea complexului antigen-anticorp rezultat de a lega complementul, care este detectat... ... Dicționar medical mare

REACȚIA DE FIXARE A COMPLEMENTULUI (FFR)- foarte sensibil și specific. serologic reacție folosită pentru a diagnostica plural. infectioase și bolile invazive ale femeilor. Constă din două consecutive. faze În prima fază, antigenul este amestecat cu serul de testat și complementul (un complex de proteine... ... Dicţionar Enciclopedic Agricol

- (învechit) vezi Reacția de fixare a complementului... Dicționar medical mare

reacție de respingere a complementului- reacția rus (g) de fixare a complementului, reacția (g) Bordet Zhangou; reacție (g) respingere a complementului; alexin fixation reaction (g) eng complement fixation test fra réaction (f) de fixation du complément deu Komplementbindungsreaktion (f) spa… … Securitatea și sănătatea în muncă. Traducere în engleză, franceză, germană, spaniolă

Vezi Reacția de fixare a complementului. (

Reacția de hemoliză.

Reacția de hemoliză (HR) - Aceasta este distrugerea celulelor roșii din sânge prin acțiunea anticorpilor cu participarea complementului.

Componentele RG.

1. Antigenul- 3% suspensie de globule roșii în soluție izotonică de clorură de sodiu;

2. Anticorp - ser hemolitic- care contine ser anticorpi la celulele roșii din sânge (hemolisine); serul se obtine prin imunizarea iepurilor cu eritrocite de oaie;

3. Completa– un sistem de proteine ​​din sânge care se adsorb pe complexul antigen-anticorp și formează un complex de atac membranar care distruge antigenul, adică. distruge globulele roșii sau, cu alte cuvinte, provoacă liza globulelor roșii ( hemoliza). Proaspăt preparat Ser de sânge de cobai.

Dacă celulele roșii din sânge, serul hemolitic și complementul sunt plasate într-o eprubetă în anumite cantități, atunci în câteva minute va avea loc distrugerea (hemoliza) globulelor roșii, în urma căreia amestecul de roșu închis va deveni roz. („sânge lac”).

Reacția de hemoliză este utilizată ca indicator la efectuarea reacției de fixare a complementului.

Reacția de fixare a complementului (CFR) este o reacție serologică complexă care implică 2 sisteme antigen-anticorp și complement. primul sistem - specific, a 2-a - hemolitic sistem.

Această reacție a fost dezvoltată de J. Bordet și O. Zhangou, care au stabilit că în timpul formării unui complex antigen-anticorp, complementul se leagă de acest complex. Efect vizibilîn care nu este vizibil, prin urmare, pentru a detecta legarea complementului (și, în consecință, pentru a detecta formarea unui complex antigen-anticorp atunci când acestea corespund între ele), adică. la fel de indicator Se folosește al doilea - sistemul hemolitic.

RSC este utilizat mai des pentru serodiagnostic (detecția anticorpilor la agentul patogen în serul sanguin al pacientului ) gonoree, sifilis, tuse convulsivă, tifos și alte rickettzioze și multe boli virale. RSC este, de asemenea, utilizat pentru seroidentificare.

Componentele RSK.

1. Antigen– extracte microbiene, haptene, mai rar – o suspensie de microbi, i.e. antigenul poate fi fie corpuscular (insolubil), fie molecular (solubil).

2 . Anticorp– ser sanguin al unei persoane bolnave (pentru serodiagnostic) sau imunitar ser de diagnostic, care conțin anticorpi cunoscuți (dacă sunt seroidentificați).

3. Globule roșii de oaie – antigene reacție hemolitică.

4. Ser hemolitic- care contine ser anticorpi la eritrocitele de oaie. Ser obține prin imunizarea unui iepure cu eritrocite de oaie.

5. Completa– ser de sânge de cobai proaspăt preparat (lichid sau liofilizat).

6. Electrolit – soluție izotonă clorura de sodiu.

Organizat de RSK.

Înainte de experiment, antigenul, serul pacientului, serul hemolitic și complementul sunt titrate (se determină titrul acestora). Serul pacientului este încălzit la 56°C timp de 30 de minute.

RSK se efectuează în 2 faze.

Faza I - specific: într-o eprubetă se prepară un sistem specific - se amestecă cantități egale dintr-un antigen cunoscut, serul pacientului și complementul, în altă eprubetă se prepară un sistem hemolitic - un amestec de eritrocite de oaie și ser hemolitic, tuburile se pun într-un termostat la 37°C timp de 30 minute. În același timp, se pregătesc controale pentru antigen, complement și hemosistem, probe de control cu ​​serul unui bolnav cunoscut (ser pozitiv) și al unei persoane sănătoase cunoscute (ser negativ) și, de asemenea, se pun într-un termostat timp de 30 de minute.

Faza II - indicator: la amestecul inițial și la toate tuburile de control se adaugă cantități egale de sistem hemolitic și se iau în considerare rezultatele reacției după ținerea într-un termostat timp de 30 de minute.

Contabilitatea rezultatelor DSC efectuate cu rezultate perfecte în controale .

Reacție pozitivă(o persoană este bolnavă și serul său conține anticorpii corespunzători la agentul cauzator al bolii - antigen): în faza I, se formează complexe antigen-anticorp într-un sistem specific, cu care complementul se leagă după adăugarea sistemului hemolitic; faza II, hemoliza nu este observată, deoarece complementul este legat de 1-lea sistem specific. Efect vizibil- educatie sedimentul eritrocitar.

Reacție negativă(o persoană este sănătoasă și nu există anticorpi împotriva agentului cauzal în serul său): nu se formează complexe antigen-anticorp și complementul în faza I rămâne liber după adăugarea sistemului hemolitic în faza II, complementul se leagă de antigen-anticorp; complexe care sunt neapărat prezente aici (acestea sunt complexe eritrocite-anticorpi) anticorpi anti-eritrocitari) și provoacă hemoliza globulelor roșii. Efect vizibil– hemoliza globulelor roșii – „sânge lac”

În diagnosticare boli infecțioase folosit de asemenea reacția de neutralizare (RN) a toxinei cu ser antitoxic, reacție de imunofluorescență (RIF), radioimunotest (RIA), test imunosorbent legat de enzime (ELISA).

Testul de fixare a complementului este unul dintre testele serologice tradiționale utilizate pentru a diagnostica multe boli virale și, de asemenea, formează baza altor metode de detectare a anticorpilor antivirali. Deși reacția de neutralizare, inhibarea hemaglutinării, hemaglutinarea indirectă și imunotestul enzimatic sunt superioare reacției de fixare a complementului în sensibilitate, simplitatea tehnicii, detectarea precoce a anticorpilor, precum și identificarea antigenelor virale care nu au proprietăți hemaglutinante explică. utilizarea sa pe scară largă în studii virologice.

Producerea sa nu necesită un grad atât de ridicat de concentrație și puritate a medicamentelor antigenice, care sunt necesare pentru o serie de alte reacții imunologice. În plus, specificitatea de grup a antigenelor de fixare a complementului a multor virusuri face posibilă utilizarea reacției de fixare a complementului în diagnosticarea în masă: această reacție nu dezvăluie diferențe de tulpină și are o valoare deosebită atunci când se studiază relațiile antigenice dintre viruși.

Numele în sine reflectă în mare măsură esența metodei, care constă din două reacții separate. În prima etapă, reacția implică antigene și anticorpi (una dintre aceste componente este cunoscută în prealabil), precum și complement într-o cantitate titrată. Dacă antigenul și anticorpii se potrivesc, complexul lor se leagă de complement, care este detectat în a doua etapă folosind un sistem indicator (un amestec de globule roșii de oaie și antiser la acestea). Dacă complementul este legat de interacțiunea dintre antigen și anticorpi, atunci liza globulelor roșii de oaie nu are loc (reacție de fixare pozitivă a complementului). La reacție negativă Fixarea complementului, complementul nelegat favorizează hemoliza, prin care se apreciază rezultatele reacției.

Componentele principale ale reacției de fixare a complementului sunt antigenele (cunoscute sau detectabile), anticorpii (antiserurile cunoscute sau serurile de testare), complementul, serul hemolitic și hematiile de oaie; Ca diluant se utilizează soluție izotonică de clorură de sodiu (pH 7,2-7,4) sau diverse soluții tampon. Antigenele și serurile pot fi anti-complementare, de exemplu. capacitatea de a adsorbi complementul, care întârzie hemoliza și distorsionează rezultatul reacției.

Antigenele pentru CSC sunt preparate din organele animalelor infectate, din lichidul alantoic sau amniotic al embrionilor de pui infectați, precum și din fluidul de cultură după cultivarea virusurilor în culturi de celule tisulare. Preparatele antigenice conțin întotdeauna o mulțime de substanțe de balast din celule animale sau culturi de țesuturi, care pot denatura și rezultatele reacției.

Antigenele virale rezultate sunt inactivate, se determină doza de lucru, precum și proprietățile anti-complementare și hemolitice. Antigenul este apoi titrat în prezența complementului.

A doua componentă principală în stadializarea reacției este complementul. Acest termen se referă la un sistem complex de proteine ​​și factori prezenți în sângele animalelor și al oamenilor. De obicei, serul sanguin de cobai este utilizat în reacția de fixare a complementului. Activitatea (titrul) complementului este cea mai mică cantitate a acesteia, în prezența căreia hemolizina determină hemoliza completă a sistemului hemolitic utilizat.

Pentru a identifica anticorpii care fixează complementul la viruși, serul trebuie să fie inactivat pentru a elimina complementul la 560C timp de 30 de minute. Serurile de la animale imunizate sunt utilizate de obicei ca ser de referință. Mai mult, pentru imunizare se folosesc antigeni virali care sunt complet purificați din impuritățile tisulare, deoarece în caz contrar are loc o reacție nespecifică pronunțată.

O componentă obligatorie a reacției de fixare a complementului este sistemul hemolitic, care include eritrocitele de oaie și serul hemolitic obținut prin hiperimunizarea iepurilor cu eritrocite de oaie.

Pentru efectuarea reacției de fixare a complementului se folosesc următoarele modificări: micrometoda reacției de fixare a complementului într-un microtitrator cu sistem Takachi, reacția de fixare a complementului pe termen lung, reacția de fixare indirectă a complementului, reacția de fixare a complementului într-un gel, micropicătura reacție de fixare a complementului, reacția de fixare a complementului pe bază solidă.

Deși sensibilitatea reacției de fixare a complementului este scăzută, aceasta are o specificitate ridicată. În acest sens, este utilizat pe scară largă pentru diagnosticul pneumoenteritei virale la bovinele tinere.

Reacția de fixare a complementului (CFR) este aceea că atunci când antigenele și anticorpii corespund între ele, ele formează un complex imun la care complementul (C) este atașat prin fragmentul Fc al anticorpilor, adică complementul este legat de complexul antigen-anticorp. Dacă nu se formează complexul antigen-anticorp, atunci complementul rămâne liber.

Interacțiunea specifică a AG și AT este însoțită de adsorbția (legarea) complementului. Deoarece procesul de fixare a complementului nu este vizibil vizual, J. Bordet și O. Zhangu au propus utilizarea sistemului hemolitic (eritrocite de oaie + ser hemolitic) ca indicator, care arată dacă complementul este fixat de complexul AG-AT. Dacă AG și AT corespund între ele, adică s-a format un complex imun, atunci complementul este legat de acest complex și nu are loc hemoliză. Dacă AT nu corespunde cu AG, atunci complexul nu se formează și complementul, rămânând liber, se combină cu cel de-al doilea sistem și provoacă hemoliză.

Progresul de reacție

Reacția are loc în două faze care implică două sisteme; bacteriene și hemolitice. Prima reacție (specifică) implică antigen 4-+ anticorp + complement. Un rezultat pozitiv de reacție, care apare atunci când anticorpii se potrivesc cu un antigen, se caracterizează prin formarea unui complex bacterian specific antigen-anticorp cu complement adsorbit sau, după cum se spune, „legat”. Rămânând invizibil, complexul nu provoacă nicio modificare exterioară în mediul în care s-a format. Un rezultat negativ RSC apare în absența afinității specifice între antigen și anticorpul seric și este caracterizat prin conservarea complementului activ liber. Prima fază a RSC poate fi efectuată într-un termostat la 37°C (1-2 ore) sau într-un frigider la 3-4°C (18-20 ore). Odată cu formarea prelungită a complexului imun antigen-anticorp la rece, are loc o legare mai completă a complementului și, ca urmare, sensibilitatea reacției crește. Când efectuează experimente comparative, imunologul sovietic Academician. V.I Ioffe și studenții săi au arătat că în condiții de fixare prelungită a complementului la frig, este posibil să se capteze cantități de antigen de 100-500 de ori mai mici și să se obțină rezultate pozitive cu diluții mai mari de ser imun decât în ​​experimentul de fixare a complementului la o temperatură de 37 ° C timp de 1-2 ore A doua fază a reacției (indicativ) are loc între reactivii sistemului hemolitic (un amestec de 3% suspensie de eritrocite și ser hemolitic în volume egale) la o temperatură de 37 ° C. numai în prezența complementului care rămâne liber din prima fază a reacției (reacție negativă) . În absența complementului activ liber, nu are loc hemoliza globulelor roșii sub influența hemolizinelor specifice (reacția este pozitivă).

Componente

Reacția de fixare a complementului (CFR) este un complex reacții serologice. Pentru a-l realiza sunt necesare 5 ingrediente si anume: AG, AT si complement (primul sistem), eritrocite de oaie si ser hemolitic (al doilea sistem).

Antigenul pentru CSC poate fi culturi de diferite microorganisme ucise, lizatele acestora, componente ale bacteriilor, organe alterate patologic și normale, lipide tisulare, viruși și materiale care conțin virusuri.

Serul de cobai proaspat sau uscat este folosit ca complement.

Mecanismul de reacție

RSK se efectuează în două faze: prima fază - incubarea unui amestec care conține trei componente antigen + anticorp + complement; Faza a 2-a (indicator) - detectarea complementului liber în amestec prin adăugarea acestuia a unui sistem hemolitic format din eritrocite de oaie și ser hemolitic care conține anticorpi împotriva acestora. În prima fază a reacției, când se formează complexul antigen-anticorp, complementul se leagă, iar apoi în a 2-a fază nu va avea loc hemoliza eritrocitelor sensibilizate de anticorpi; reactia este pozitiva. Dacă antigenul și anticorpul nu se potrivesc între ele (nu există antigen sau anticorp în proba de testat), complementul rămâne liber și în a 2-a fază se va alătura complexului eritrocit - anticorp antieritrocitar, determinând hemoliză; reactia este negativa.

Aplicație

Reacția de fixare a complementului poate fi utilizată pentru:
1) identificarea anticorpilor specifici în ser necunoscut pe baza interacțiunii lor cu un antigen de natură cunoscută;
2) studierea proprietăților antigenului în reacție cu un ser specific cunoscut. Prepararea ingredientelor pentru punerea în scenă a RSC.

1. Serul sanguin obtinut pentru cercetare, in ajunul reactiei, se incalzeste intr-o baie de apa la 56°C timp de 30 de minute pentru a-si inactiva propriul complement. Serul inactivat poate fi păstrat la 3-4°C timp de 5-6 zile. În ziua experimentului, serul este diluat cu soluție izotonică de clorură de sodiu într-un raport de 1:5 (0,1 ml ser de testare + 0,4 ml soluție izotonică de clorură de sodiu).

2. Antigenul pentru producerea CSC poate fi culturi de diverși microbi, proteine ​​bacteriene și extracte obținute din culturi microbiene, organe și țesuturi alterate patologic și normale. Specificul preparării antigenului este determinat de natura procesului infecțios și de caracteristicile agentului patogen al acestuia.

3. Complementul este un amestec de seruri obtinute de la 3-5 cobai sanatosi, sau complement uscat in fiole.

Imediat înainte de utilizare, serul de cobai este diluat cu o soluție izotonică de clorură de sodiu în raport de 1:10 pentru a obține o soluție stoc.

4. Înainte de efectuarea experimentului, serul hemolitic este inactivat prin încălzire la o temperatură de 56 °C timp de 30 de minute. Pentru a efectua experimentul RSC principal, precum și pentru a titra complementul și antigenul, se utilizează ser hemolitic în titru triplu. De exemplu, dacă titrul serului hemolitic este de 1:1800, în reacție se folosește o diluție a serului de 1:600.

5. Eritrocitele sunt obținute din sânge de oaie defibrinat. Pentru a îndepărta peliculele de fibrină, sângele este filtrat printr-un filtru de tifon cu trei straturi. Filtratul rezultat este centrifugat, serul este aspirat și drenat, iar eritrocitele sunt spălate prin centrifugare de 3-4 ori cu o soluție izotonică de clorură de sodiu. Când celulele roșii din sânge sunt spălate pentru ultima dată, stratul de lichid supernatant trebuie să fie complet transparent. Se prepară o suspensie 3% din eritrocite spălate într-o soluție izotonică de clorură de sodiu. După ce au pregătit ingredientele implicate în RSC în modul de mai sus, treceți la titrarea serului hemolitic, a complementului și a antigenului.

61. Reacții care implică complement. Reacția de fixare a complementului. Mecanism, componente, metode de instalare, aplicare. Reacție de hemoliză radială

Reacții care implică complement

Reacții care implică complementse bazează pe activarea complementului de către complexul antigen-anticorp (reacție de fixare a complementului, hemoliză radială etc.).

Reacția de fixare a complementului (RSK) este că atunci când antigenele și anticorpii corespund între ele, ele formează un complex imun, la care, prin Fc -fragmentul de anticorp este atașat la complement (C), adică complementul este legat de complexul antigen-anticorp. Dacă nu se formează complexul antigen-anticorp, atunci complementul rămâne liber (Fig. 13.8). RSK se efectuează în două faze: prima fază - incubarea unui amestec care conține trei componente antigen + anticorp + complement; Faza a 2-a (indicator) - detectarea complementului liber în amestec prin adăugarea acestuia a unui sistem hemolitic format din eritrocite de oaie și ser hemolitic care conține anticorpi împotriva acestora. În prima fază a reacției, când se formează complexul antigen-anticorp, complementul se leagă, iar apoi în a 2-a fază nu va avea loc hemoliza eritrocitelor sensibilizate de anticorpi; reactia este pozitiva. Dacă antigenul și anticorpul nu se potrivesc între ele (nu există antigen sau anticorp în proba de testat), complementul rămâne liber și în a 2-a fază se va alătura complexului eritrocit - anticorp antieritrocitar, determinând hemoliză; reactia este negativa.

RSC este utilizat pentru a diagnostica multe boli infecțioase, în special sifilisul (reacția Wassermann).

Această reacție este utilizată pentru a detecta anticorpi în serul sanguin al pacienților cu infecții bacteriene, virale, protozoare, precum și pentru a identifica și tipa virusuri izolate de la pacienți. RSC se referă la reacții serologice complexe la care, pe lângă antigen, anticorp și complement, participă și sistemul hemolitic, dezvăluind rezultatele reacției. RSC se desfășoară în două faze: prima este interacțiunea antigenului cu anticorpul cu participarea complementului și a doua este identificarea gradului de legare a complementului folosind sistemul hemolitic. Acest sistem este format din globule roșii de oaie și ser hemolitic obținut prin imunizarea animalelor de laborator cu globule roșii. Eritrocitele sunt procesate - sensibilizate prin adăugarea de ser la ele la o temperatură de 37°C timp de 30 de minute. Liza eritrocitelor de oaie sensibilizate are loc numai dacă acestea se alătură sistemului complement hemolitic. În absența acestuia, globulele roșii nu se modifică. Rezultatele RSC depind de prezența anticorpilor în serul de testat. Dacă serul conține anticorpi omologi cu antigenul utilizat în reacție, atunci complexul antigen-anticorp rezultat se leagă și leagă complementul. La adăugarea unui sistem hemolitic, în acest caz, nu va avea loc hemoliza, deoarece tot complementul este cheltuit pentru conexiunea specifică a complexului antigen-anticorp. Globulele roșii rămân neschimbate, astfel încât absența hemolizei în eprubetă este înregistrată ca RBC pozitiv. În absența anticorpilor corespunzători antigenului din ser, nu se formează un complex specific antigen-anticorp și complementul rămâne liber. Când se adaugă un sistem hemolitic, complementul se atașează de acesta și provoacă hemoliza globulelor roșii. Distrugerea globulelor roșii și hemoliza acestora caracterizează o reacție negativă.

Pentru a stadializa RSC, sunt necesare următoarele: serul pacientului, complementul, un sistem hemolitic format din eritrocite de oaie și ser hemolitic, precum și o soluție izotonică de clorură de sodiu. Reacția se efectuează în tuburi serologice. Globulele roșii de oaie sunt obținute din sânge de oaie defibrinat prin spălarea lor de trei ori cu soluție izotonică de clorură de sodiu. Serul hemolitic este produs gata făcut în fiole, a căror etichetă indică titrul său, adică diluția maximă a serului, care încă provoacă hemoliză atunci când este adăugat la globulele roșii în prezența complementului. Serul hemolitic se obține prin imunizarea animalelor, precum iepurii, cu globule roșii de oaie. La stabilirea reacției, serul este utilizat în titru triplu. De exemplu, titrul serului hemolitic este de 1: 1200, iar diluția de lucru este de 1: 400. Se folosește ser proaspăt de sânge de cobai (în 24-48 de ore) sau complement uscat în fiole. Înainte de efectuarea RSC, complementul este diluat 1:10 și titrat pentru a stabili titrul - cea mai mică cantitate de complement care este produsă prin hemoliza globulelor roșii atunci când este combinată cu sistemul hemolitic utilizat în această reacție. Ținând cont de posibilele proprietăți anti-complementare ale antigenului, la stabilirea unei reacții, se face o creștere cu 20-30% a titrului de lucru stabilit al complementului.
Antigenul pentru RSC sunt suspensii de bacterii ucise, extracte preparate din aceste suspensii și fracțiuni chimice individuale ale microbilor. Principala cerință pentru antigen este absența inhibării activității complementului. Nu ar trebui să aibă proprietăți anti-complementare. Pentru a identifica aceste proprietăți ale antigenului, complementul este titrat suplimentar în prezența antigenului utilizat în reacție. Există anumite scheme de punere în scenă a RSC. Rezultatele reacției sunt luate în considerare de prezența sau absența hemolizei celulelor roșii din sânge în sistemul hemolitic. RSC este utilizat în diagnosticul de sifilis (reacție Wassermann), gonoree (reacție Bordet-Gengou), toxoplasmoză, boli rickettsiale și virale.

Reacția de hemoliză radială (RRH) ) plasat în godeurile unui gel de agar care conține globule roșii de oaie și complement. După introducerea serului hemolitic (anticorpi împotriva globulelor roșii de oaie) în godeurile gelului, în jurul lor se formează o zonă de hemoliză (ca urmare a difuziei radiale a anticorpilor). În acest fel, este posibilă determinarea activității complementului și a serului hemolitic, precum și a anticorpilor din serul sanguin al pacienților cu gripă, rubeolă și encefalită transmisă de căpușe. Pentru a face acest lucru, antigenele corespunzătoare ale virusului sunt adsorbite pe eritrocite, iar serul de sânge al pacientului este adăugat în godeurile gelului care conține aceste eritrocite. Anticorpii antivirali interacționează cu antigenii virali adsorbiți pe eritrocite, după care componentele complementului se alătură acestui complex, determinând hemoliză.