Antinüvə antikorları (ANA, ANA, antinüvə antikorları, antinüvə faktoru-ANF) - lüminesans növünün təyini ilə HEp-2 hüceyrə xətti üzrə NIF üsulu.- birləşdirici toxuma otoimmün xəstəliklərinin göstəricisi. ANA hüceyrə nüvələrində olan zülallara və digər komponentlərə (o cümlədən DNT daxil olmaqla) qarşı otoantikorlar qrupudur. İstifadə üçün əsas göstərişlər: diaqnozun istisna edilməsi - sistemik lupus eritematosus (ANA-ların SLE hallarının 90% -ində meydana gəldiyinə inanılır, başqa sözlə, təxminən 90% ehtimalla mənfi nəticə SLE diaqnozunu istisna edir), diferensial diaqnoz sistemik kollagenozlar (sistemik lupus eritematosus, skleroderma, periarterit nodosa, dermatomiyozit), xroniki aktiv hepatit.

Bu günə qədər nuklein turşularına, histonlara, nüvə membran zülallarına, spliceosom komponentlərinə, ribonukleoroproteinlərə, nüvə və sentromer zülallarına qarşı yönəlmiş 200-dən çox ANA çeşidi təsvir edilmişdir. Eyni zamanda, birləşdirici toxuma zərər verirlər, bu da sistemli birləşdirici toxuma xəstəlikləri üçün bir test kimi antinüvə amilinin təyin edilməsinə kömək etdi. "Antinuclear amil" termini dolayı immunofluoressensiya metodundan istifadə edərək antinüvə anticisimlərini aşkar etmək üçün bir testə aiddir.

Qanda antinüvə amilinin (antinuclear antikorlar) aşkarlanması üsullarından biri xəstə zərdabını davamlı insan hüceyrə xətti HEp-2 (Hep-2 qırtlaq hüceyrələrinin insan epitelial karsinoması) toxuma hüceyrələrinə tətbiq etməklə dolayı immunofluoressensiya üsuludur. müxtəlif nüvə antigenləri olan xətt), insan antikorları ilə etiketlənmiş konjugatdan istifadə etməklə. Digər insan hüceyrə xətləri də substrat kimi istifadə edilə bilər, lakin onların yaxşı morfologiyası və becərilməsi asanlığı sayəsində Hep-2 dolayı immunofluoressensiya üçün ümumi qəbul edilmiş substrata çevrilmişdir. ANF-nin aşkarlanması üçün bir üsul 1982-ci ildə Tan tərəfindən substrat kimi insan davamlı epiteloid hüceyrə xətti HEp-2 istifadə edərək hazırlanmışdır. İnsan qırtlaq adenokarsinomasından əldə edilən bu hüceyrə xətti şüşə üzərində monolayer əmələ gətirən iri poliploid keratinləşdirici olmayan skuamöz epitel hüceyrəsidir. Xəstənin serumu toxuma substratı ilə inkubasiya edilir və xəstənin zərdabından (əgər varsa) antinüvə anticisimləri müvafiq nüvə antigenlərinə bağlanır. Avtoantikor bağlama yerləri flüoresan etiketli anti-insan antiserumundan istifadə etməklə aşkar edilir. Reaksiya nəticələri lüminessent mikroskopdan istifadə edərək mikroskopiya və bağlı antikorların lüminesansının təbiətinin vizual qiymətləndirilməsi ilə qiymətləndirilir. HEp-2-nin üstünlükləri arasında (heyvan toxumalarının kriozeksiyası ilə müqayisədə) hüceyrə bölünməsinin yüksək tezliyini qeyd etmək olar ki, bu da yalnız hüceyrə bölünməsi zamanı ifadə olunan antigenlərə qarşı antikorları aşkar etməyə imkan verir və toxuma hüceyrə matrisinin olmaması, histoloji bölmələrlə müqayisədə xüsusi lüminessensiyanı görüntüləməyi çətinləşdirir. Bəzi xəstəliklərdə, məsələn, SLE, sistemli skleroderma (sistemik skleroz) və bəzi infeksiyalarda xəstənin immun sistemi öz toxuma hüceyrələrinin nüvələrini (nüvə zülallarını) yad kimi qəbul edir və onlara qarşı anticisimlər (antinuclear antikorlar - AHA) istehsal edir. Eyni zamanda, birləşdirici toxuma zərər verirlər, bu da sistemli birləşdirici toxuma xəstəlikləri üçün bir test kimi antinüvə amilinin təyin edilməsinə kömək etdi.

Məlumatları şərh edərkən nəzərə almaq lazımdır ki, AHA spektrinə DNT, nukleoproteinlər, histonlar, nüvə ribonukleoproteinləri və digər nüvə komponentlərinə qarşı böyük bir otoantikor qrupu daxildir. Beləliklə, test SLE-də ilk dəfə aşkar edilmiş nüvə və sitoplazmik komponentlərə qarşı müxtəlif antikorları aşkar etmək məqsədi daşıyır. Daha diaqnostik meyarlar Bu antikorların digər birləşdirici toxuma xəstəliklərində aşkarlanması səbəbindən test genişləndirilib.

Ümumi ANA-nın müəyyən edilməsi üçün skrininq testləri adətən otoimmün birləşdirici toxuma xəstəliklərinin əsas markerləri olan aşağıdakı antigenlər dəstindən istifadə edir: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP/Sm, J01, sentromer B.
IgG sinfinin nüvə antikorlarını aşkar etmək üçün müasir dəstlərdə istifadə olunan əsas antigenlər aşağıdakı dəstlə təmsil olunur:

1. SS-A (Ro) - nüvə ribonukleoproteinləri (polipeptidlər). Onlara qarşı anticisimlər daha çox sistemli sklerodermada (60% hallarda), Sjogren sindromunda (70% -ə qədər) və SLE-də (30% -ə qədər hallarda) aşkar edilir. Hesab edilir ki, bu antikorlar hamilə qadınların qanında aşkar edilərsə, bu, yeni doğulmuş uşaqda neonatal lupusa bənzər sindromun (neonatal lupus sindromu) baş vermə riskinin artmasının göstəricisidir. Bu ana antikorları plasentanı keçərək dölün zədələnməsinə səbəb olur, bu da hemolitik anemiya və trombositopeniyaya səbəb olur. Ciddi nəticələrə uşağın ürəyinin keçirici sisteminin zədələnməsi daxildir (daimi ürək stimullaşdırılmasına qədər). Qeyd olundu ki, hamiləlik dövründə bu antikorların əhəmiyyətli titrə malik olan qadınlarda aşkar olmadan klinik əlamətlər, sonradan SLE daxil olmaqla hər hansı bir otoimmün xəstəliyi inkişaf etdirir.
2. SS-B (La) - nüvə zülalları. Onlara qarşı antikorlar Sjogren sindromu ilə 60% -ə qədər və SLE ilə 15% hallarda aşkar edilir.
3. Scl-70, nuklein turşularının (topoizomeraz-1) metabolizmində iştirak edən bir ferment proteinidir. Bu proteinə qarşı antikorlar sistemli skleroderma üçün ən spesifikdir (halların 70% -ə qədər).
4. İki zəncirli DNT yerli DNT-dir. DNT-yə qarşı anticisimlər SLE-də ən spesifikdir (halların 80%-ə qədəri) və romatoid artrit və sklerodermada praktiki olaraq aşkar edilmir.
5. RNP/Sm - RNP/Sm antigen kompleksi U1-ribonukleoproteinlərdən ibarətdir: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; və həmçinin Sm-polipeptidlərdən: SmA | , SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Bu antigenlərə qarşı əmələ gələn antikorlar birləşdirici toxumanın qarışıq xəstəlikləri üçün ən spesifikdir - yəni. skleroderma əlamətləri varsa, romatoid artrit, SLE, polimiyozit (təxminən 95% hallarda) və daha az dərəcədə SLE üçün (halların 30% -ə qədər).
6. Jo-1 bir aminoasil transfer RNT sintetaza fermentidir. Bu zülala qarşı otoantikorlar miyozit (polimiyozit/dermatomiyozit) üçün diaqnostik əhəmiyyətlidir.
7. CENP-B (Centromere) - CREST sindromunun diaqnostikası məqsədilə (bu sindrom dərinin kalsifikasiyası, Raynaud sindromu, özofagus hərəkətliliyinin pozğunluqları, sklerodaktiliya, telenjiektaziyanın birləşməsidir) üçün Anti-Sentromer anticisimlərini (Anti-Sentromer B) aşkar etmək üçün. CREST sindromu sistemik sklerozun bir variantına (sistemik skleroz) aiddir. Xəstələrdəki bu antikorlar sistemli sklerodermanın əlverişli gedişatını göstərir və daxili orqanlara cüzi ziyan vurur.
8. Hep-2 hüceyrələri SS-A (Ro) antigenləri və sentromer antigenləri də daxil olmaqla bir çox müxtəlif nüvə antigenlərini ehtiva edən Hep-2 nəslinin insan qırtlaq epitelial karsinoma hüceyrələridir. Hep-2-yə qarşı antikorlar polimiyozit və dermatomiyozitli xəstələrdə 90% hallarda aşkar edilir.
9. Mitoxondriya (PDC) - PDC - piruvat dehidrogenaz kompleksi. Antimitoxondrial anticisimlərin böyük bir qrupu hüceyrələrin mitoxondrilərində yerləşən və piruvatın oksidləşdirici dekarboksilləşməsində iştirak edən piruvatdehidrogenaza kompleksinin fermentlərinə qarşı əmələ gələn autoanticisimlərdir.

ANAlara tez-tez biliar sirozda rast gəlinir.

AHA ümumiyyətlə canlı hüceyrələrə nüfuz etmir və buna görə də zərərsizdir. Ancaq bəzən onlar toxuma zədələnməsinə səbəb olan antigen-antikor kompleksləri əmələ gətirirlər (SLE-də, böyrəklərin zədələnməsi kimi). Patoloji prosesdə bir çox orqanların iştirakına görə AHA-nın təyininin diaqnostik dəyəri kiçikdir və analizin nəticələri klinik məlumatları yalnız qismən təsdiqləyir.

Revmatik xəstəliklərlə yanaşı, ANA-lara xroniki aktiv hepatitlərdə də 50% hallarda rast gəlinir. Görünüş (aşağı titrlər) olduqda mümkündür iltihabi xəstəliklər, onkologiya və viral infeksiyalar.

• Antinüvə anticisimlərinin aşkarlanmasının müqayisəli tezliyi.
  

  Xəstəlik və vəziyyət	Aşkarlanma tezliyi, %
  SCR	95-100
  Lupoid hepatit (yeni ad - xroniki otoimmün hepatit)	70 -80%
  Felty sindromu (Felty. 1924) - revmatoid artrit + splenomeqaliya + neytropeniya + leykopeniya + limfadenopatiya.	95-100
  Sistemli skleroderma	75-80
  Dərmanla əlaqəli lupus sindromu (hidralazin, prokainamid, izoniazid)	Təxminən 50
  Sjöqren sindromu (Birləşdirici toxumanın otoimmün sistem zədələnməsi. Patoloji prosesdə ekzokrin vəzilərin, əsasən tüpürcək və gözyaşı vəzilərinin iştirakı və xroniki mütərəqqi gedişi ilə xarakterizə olunur).	40-75
  SLE olan bir xəstənin klinik cəhətdən sağlam qohumları	Təxminən 25
  Diskoid lupus eritematosus	15-50
  Xroniki juvenil artrit, romatoid artrit	15-30
  Periarterit nodosa	15-25
  Dermatomiyozit və polimiyozit	10-30
  Revmatizm	5 ətrafında
  Raynaud sindromu	15-20

Antikorlara əsaslanaraq və onların qan plazmasında konsentrasiyasını təyin edərək, bədənin bir çox vəziyyətinə diaqnoz qoyulur. Göstəricilərdən biri, hüceyrə komponentlərinə qarşı yönəlmiş müxtəlif növ antikorlar qrupunu öz adı altında birləşdirən antinüvə faktorudur. Belə bir faktor müəyyən edildikdə, bir otoimmün xəstəlik, xüsusən də sistemik lupus eritematosus haqqında danışmaq mantiqidir.

Test bədənin bir çox sistem patologiyalarını, xüsusən də lupus eritematosus kimi ciddi bir xəstəliyi müəyyən etmək üçün universal olsa da, bəzi maraqlı xüsusiyyətlər onunla əlaqələndirilir. 1957-ci ildən istifadə olunmağa başladı, lakin texnika yalnız ötən əsrin 80-ci illərinin sonlarından geniş yayıldı. Qeyd etmək lazımdır ki, döşdə implantların olması antinüvə antikorlarının titrini artırır, bu, qadın xəstələrdə bütün halların 5% -dən 55% -ə qədər müşahidə olunur.

Onlar nədirlər?

Antinüvə amilini ehtiva edən antikor kompleksi 200-dən çox göstərici ilə təmsil olunur, əksər hallarda bunlar G sinif immunoqlobulinləri, nadir hallarda IgM və IgA. İmmunitet sisteminin öz toxumalarına tolerantlığının pozulması nəticəsində lezyonun otoimmün və ya revmatik təbiəti ilə xarakterizə olunan patologiyalarda görünürlər.

Bəzi hallarda immunitet sistemi bütün qüvvələrini yad amillərlə deyil, öz toxuma və hüceyrələri ilə mübarizə aparmağa yönəldir ki, bu da normalda baş verməməlidir. Təcavüzün yönəldiyi müəyyən hüceyrələrə qarşı dözümlülük pozulur və otoimmün xəstəlik inkişaf edir. Xəstəlik prosesi və ya komplekslər zamanı istehsal olunan antikorlara otoimmün deyilir.

Bir çox insanlarda az miqdarda otoantikor var, lakin bu xəstəlik əlaməti deyil. Yalnız immunitet sisteminin ciddi pozulması otoantikorların səviyyəsinin artmasına səbəb ola bilər, bu, müvafiq diaqnoz qoymaq üçün bir səbəbdir; Ancaq yenə də digər tədqiqatlarla, xüsusən qan, sidik, eləcə də klinik təzahürlərlə tamamlanmalıdır.

Sistemik lupus eritematosusdan əziyyət çəkən bir insanda ANF ilk simptomlar meydana gəlməzdən əvvəl də artır. Bütün xəstələrin 95% -ində qanda antinüvə faktoru artmışdır ki, bu da xəstəliyin simptomları ilə tamamlanır və bu da öz növbəsində diaqnozu təsdiqləyir.

Faktorun baş vermə mexanizmi

İnsanlarda xəstəliyin inkişafına kömək edən bir neçə səbəb var. Hər şey müəyyən bir ardıcıllıqla baş verir:

1. Günəşdən gələn ultrabənövşəyi radiasiyanın təsiri altında dəri apoptoz adlanan əvvəlcədən genetik olaraq proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü prosesləri işə salınır. Bu, bədənin normal bir reaksiyasıdır, lakin sistemli xarakterli xəstəliklərdə lenfositlər intensiv şəkildə köçməyə başlayır.
2. Hüceyrələrin əvvəllər əlçatmaz, görünməz komponentləri immunitet sistemi üçün əlçatan olur, xüsusən də hüceyrə membranı, nüvələr, histonlar, nüvə membranı və s. Onlar çılpaq olurlar və makrofaqlar bu cür materialı təkrar emal etmək əvəzinə, bədənin immun reaksiyasını təhrik edərək məlumatları daha da ötürürlər.
3. B-limfositlər makrofaq tərəfindən verilən siqnala cavab verir, antinüvə antikorları istehsal edərək, müvafiq antigenlə qarşılıqlı əlaqə qurur, kompleks əmələ gətirir;
4. Komplekslər orqan və toxumaların membranlarına yerləşdirilir;
5. Zərər orqan funksiyasını pozur.

Təhlil, göstəricilər

Antinüvə antikor testinin təyin edildiyi bir neçə əlamət var. Hər şeydən əvvəl, sistemik lupus eritematosusun, Sjogren sindromunun inkişafına şübhə var. Biri varsa sistemli xəstəlik, həkim başqa bir şeydən şübhələnir, məsələn, antifosfolipid sindromu lupus fonunda inkişaf edə bilər.

Simptomlar və nə vaxt müayinə olunmalı

Həmişə simptomlar var, görünüşü bir insanı xəbərdar etməli və müayinədən keçməyə məcbur etməlidir. Həkim xəstəni aşağıdakı hallarda istiqamətləndirməlidir:

1. Artrit, ağrı, şişkinlik, hərəkətliliyin pozulması, üzərində dərinin qızartı və artan temperatur ilə birgə iltihabı ilə özünü göstərir.
2. Səbəbi bilinməyən perikardit və plevrit üçün müayinə zərər verməzdi.
3. İmmunitet sisteminin pozulması ilə əlaqəli böyrək zədələnməsi, sidik analizində dəyişikliklərin görünüşü, xüsusən də protein, qan.
4. Digər bir əlamət anemiyanın hemolitik variantıdır, qırmızı qan hüceyrələrinin böyük miqdarda məhv edildiyi, qan və sidik testində bilirubinin səviyyəsi artır.
5. Göstəriş lökosit formulunda trombositlərin və neytrofillərin səviyyəsinin azalmasıdır.
6. Günəşə məruz qaldıqdan sonra meydana gələn səpgilər, qalınlaşma şəklində dəridə təzahürlər.
7. Barmaqların və ayaq barmaqlarının vaxtaşırı rəng dəyişdirdiyi Raynaud sindromu. Onlar solğun, mavi və ya qırmızı olur, həssaslıq pozulur, ağrı narahat olur.
8. Göstəriş nevrologiya və ya psixiatriyadan gələn xarakterik olmayan simptomlardır.
9. Temperatur yüksəlirsə, yorğunluq inkişaf edir, bədən çəkisi azalır və limfa düyünləri böyüyür.

Tədqiqat növləri

Qanda antinüvə antikorlarını təyin etməyə imkan verən iki üsul var. Birincisi dolayı immunofluoressensiya mikroskopiyası adlanır. Onun hüceyrə xətti qırtlaqdakı adenokarsinomadan yaranıb. Antinüvə antikorları varsa, onlar xüsusi antigenlərə bağlanır, bundan sonra müəyyən bir işıq spektrində parlaya bilən etiketlər əlavə olunur. Mikroskop altında parıltının intensivliyini və növünü müəyyən etmək mümkün olur.

Bu üsul antinüvə antikorlarının səviyyəsini təyin etmək üçün ən yaxşısı kimi tanınır. Onun başqa adı var - lupus test zolaqları.

Tədqiqatın nəticəsi parıltı verən titr və ya maksimum qan seyreltməsidir. Nəticə müsbət olarsa, parıltı növü təsvir olunur. Antikorların böyük bir yığılması ilə titr artır. Aşağı titr mənfi nəticə hesab edilə bilər, yüksək titr isə antinüvə antikorlarının konsentrasiyasının artdığını göstərə bilər.

İkinci diaqnostik seçim ferment immunoassayıdır. Onun mahiyyəti ondan ibarətdir ki, qanda olan antikorlar müvafiq antigenlə təmasda olur, nəticədə məhlul rəngini dəyişir.

Qeyd etmək lazımdır ki, müsbət test nəticəsi 100% diaqnoz deyil. Bu, erkən dövrdə xəstəliyi müəyyən etməyə və müalicəni təyin etməyə kömək edəcək əlavə müayinə tələb olunan bir siqnaldır. Antinüvə amilləri üçün test mənfi olarsa, onların tam olmamasından danışa bilərik, lakin şübhəli otoimmün patologiyanın diaqnozu istisna edilmir.

Bunun üçün qan testləri etmək məcburidir müxtəlif göstəricilər. Bununla belə, nəticələrin müəyyən dərmanların qəbulundan, eləcə də kəskin və ya təsirindən təsirlənə biləcəyini xatırlamaq lazımdır xroniki xəstəliklər. Mütəxəssis həmişə bütün incəlikləri anlamağa kömək edəcək, bundan sonra diaqnoz qoyacaq və bundan sonra nə edəcəyinizi tövsiyə edəcəkdir.

HEp-2 hüceyrə xəttində antinüvə faktoru (ANF) dolayı immunofluoressensiya ilə antinüvə anticisimlərinin aşkarlanması üçün bir testdir.

Sistemik lupus eritematosus (SLE) və digər sistemik revmatik xəstəliklərdə immun cavab nukleoprotein antigenlərinə qarşı yönəldilir, yəni. nuklein turşularının və zülalların kompleksləri. Bu endogen nukleoprotein kompleksləri epitel hüceyrələrinin apoptozu prosesi zamanı əmələ gəlir və yad viral hissəciklərə bənzəyir. ultrabənövşəyi şüalanmanın təsiri altında apoptoz proseslərinin sürətləndirilməsi, viral infeksiyalar Və dərmanlar, SLE-də otoimmün cavabları tetikler. Apoptoz zamanı əsas antikor antigenləri otoantikorların hədəfinə çevrilən apoptotik cisimlərə çevrilir. Hal-hazırda nukleoproteinlərə və riboproteinlərə qarşı 200-ə yaxın antikor növü təsvir edilmişdir. nuklein turşuları, bunlara antinüvə antikorları deyilir. Otoimmün xəstəliklərdə nüvə antigenlərinə qarşı otoantikorlar insan hüceyrələrinə birbaşa sitotoksik təsir göstərmir, bununla belə, immun komplekslər, xüsusən də damarların xüsusilə nazik olduğu yerlərdə, o cümlədən böyrəklər, dəri, mərkəzi sinir sistemi, immunoloji iltihabı tetiklemeye qadirdir. oynaqların sinoviumu və plevra.

Antinüvə amilinin (ANF) sınağı, nuklein turşularına (dsDNA, ssDNA, RNT), ribonukleoproteinlərə, həmçinin əksər konformasiya və həll olunmayan antigenlərə qarşı otoantikorları aşkar etməyə imkan verən antinüvə antikorlarının aşkarlanması üçün əsas üsuldur.

Antinüvə antikorları onların davamlı insan epitelial hüceyrə xəttinin (HEp-2) hüceyrədaxili antigenlərinə bağlanması yolu ilə aşkar edilir. HEp-2 hüceyrələrinin nüvəsi və sitoplazması insan orqanizminə xas olan bütün antigenləri ehtiva edir ki, bu da bir sınaqda bütün əsas antinüvə anticisimlərini aşkar etməyə imkan verir. Aparıcı Avropa (EASIgroup2010) və Amerika mütəxəssisləri (ACRANATaskforce2008) tərəfindən antinüvə anticisimlərinin aşkarlanması üçün qızıl standart kimi HEp2 hüceyrə xətti üzrə dolayı immunofluoressensiya üsulu tövsiyə olunur. Antinüvə antikor antigenlərinin müxtəlifliyinə görə, onların hamısı antinüvə antikorlarının aşkarlanması üçün ferment immunoassaylarında istifadə üçün təmizlənə və ya sintez edilə bilməz.

HEp-2 hüceyrə xəttində ANF üçün pozitivlik sistemik lupus eritematosusda (SLE), sistemik revmatik xəstəliklərdə və bir çox otoimmün xəstəliklərdə müşahidə olunur ki, bu da onu otoimmün patologiyası olan xəstələrin müayinəsində universal testə çevirir. Sistemik lupus eritematosus və diffuz birləşdirici toxuma xəstəlikləri olan xəstələrin 90% -dən çoxunda müsbət ANF nəticəsi müşahidə olunur. dəri formaları bu xəstəlik, skleroderma və onun növləri, qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyi, Sjogren sindromu. ANF-nin aşkarlanması juvenil revmatoid artrit və autoimmun qaraciyər xəstəliklərinin diaqnostikasında böyük əhəmiyyət kəsb edir. Bu otoantikor ailəsinin nümayəndələrinə müxtəlif otoimmün (tiroidit, diabet), yoluxucu (viral hepatit), iltihablı və onkoloji xəstəliklər. Klinik sağlam insanlarda ANF tezliyi 1-3% -ə çatır və 65 yaşdan yuxarı insanlarda bir qədər artır. Yüksək ANF titrləri olan insanlar otoimmün xəstəliklərin inkişaf riski altındadır.

Göstərişlər:

• Sistemik lupus eritematosus.
• Yarımkəskin dəri lupus və digər dəri lupus növləri.
• Qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyi.
• Sjögren sindromu və əlaqəli xəstəliklər.
• Diffuz və lokallaşdırılmış skleroderma, CREST sindromu.
• İltihabi miopatiyalar (polimiyozit və dermatomiyozit).
• Yetkinlik yaşına çatmayanların xroniki artriti.
• Otoimmün hepatit.
• Birincili biliar siroz və sklerozan xolangit.
• Polinevopatiya və miyelit.

Hazırlıq


Səhər saat 8-12 arası qan vermək məsləhətdir. Qan acqarına və ya son yeməkdən 4-6 saat sonra alınır. Qazsız və şəkərsiz su içməyə icazə verilir. Müayinə ərəfəsində qida ilə həddindən artıq yüklənmədən çəkinmək lazımdır.

Nəticələrin təfsiri
Ölçü vahidləri: titr.

İstinad dəyərləri:<1:160 (отрицательно).

ANF-nin müəyyən edilməsinin nəticəsi titrdir, bu nüvənin əhəmiyyətli flüoresansının qaldığı serumun son seyreltilməsinin dəyəridir. Fraksiyanın məxrəci nə qədər yüksəkdirsə, zərdabın seyreltilməsi nə qədər çox olarsa, xəstənin serumunda bir o qədər çox antikor olur. Yüksək serum seyreltmə titrləri otoantikorların yüksək yaxınlığını və konsentrasiyasını əks etdirir.

Yüksək səviyyələrin (1/640 və yuxarı) aşkarlanması sistemli revmatik xəstəlik və ya otoimmün qaraciyər xəstəliyinin yüksək ehtimalını göstərir və diqqətli klinik, laboratoriya və instrumental müayinə tələb edir. Yüksək antinüvə amil titrlərinin olmaması sistemli otoimmün xəstəliklərin ehtimalını əhəmiyyətli dərəcədə azaldır.

Aşağı titrlərdə (1/160-a qədər) antinüvə faktoru sağlam insanların və sistem xəstəlikləri olan xəstələrin qohumlarının 1-2% -ində müşahidə edilə bilər. Əhalidə müsbət titrlərin tezliyi yaşla bir qədər artır. Antinüvə antikorlarının aşağı titrləri bir çox otoimmün, yoluxucu və onkoloji xəstəliklərdə baş verə bilər. Antinüvə antikorlarının yüksək titrlərinin olmaması sistemli revmatik prosesin ehtimalını əhəmiyyətli dərəcədə azaldır və diaqnozu təsdiqləməkdənsə, istisna etmək üçün istifadə edilə bilər.

Sistemli revmatik xəstəliklər
Antinüvə faktoru (ANF) və lüminesans növü

Antinüvə amilinin (ANF) təyini antinüvə anticisimlərinin aşkarlanması üçün əsas üsuldur ki, bu da əksər növ antinüvə anticisimlərini, o cümlədən nuklein turşularına (dsDNA, ssDNA, RNT), konformasiya və həll olunmayan antigenlərə qarşı otoantikorları aşkar etməyə imkan verir. ANF-nin təyin edilməsinin nəticəsi diaqnostik titrdə otoantikorların olması, zərdabın seyreltilməsinin son titri, otoantikorların yaxınlığını və konsentrasiyasını, həmçinin hüceyrə nüvəsinin lüminesans növünü əks etdirir. (test 01.02.15.005). Müəyyən bir texnikanın xüsusiyyətləri, ilk növbədə, kriyoseksiyalardan (siçovulların qaraciyəri və ya böyrəkləri) kultivasiya edilmiş çoxalmış hüceyrə xətlərinə (Hep2, Kb, HeLa) qədər dəyişə bilən substratın seçimindən, eləcə də toxumaların fiksasiya üsulundan asılıdır. bir sıra nüvə antigenlərinin ANA saxlanması.

Antinüvə antikorlarının aşkarlanması üçün testlərin inkişaf tarixi:

XX əsrin əvvəlləri - leykositlərin sitoplazmasında "hialin cisimlər"

1948 Hargraves, Richmond, Morton - SLE xəstələrindən leykemiyanın uzunmüddətli inkubasiyası zamanı LE hüceyrələrinin in vitro aşkarlanması üsulu

1951 Lee, Michael, Vural - periferik qan leykositləri tərəfindən limfosit nüvələrinin faqositozunu stimullaşdıran serum faktorunu kəşf etdi.

1957 Holobrow, Weir, Johnson 1950-ci ildə Coons tərəfindən hazırlanmış dolayı immunofluoressensiya metodundan istifadə edərək insan qaraciyərinin kriyoseksiyalarında ANF-ni aşkar etdilər.

1961 Beck - laboratoriya heyvanlarından istifadə edilən toxuma

1982 Tan - insan davamlı hüceyrə xətti HEp-2 istifadə etdi, bu test ANA aşkar etmək üçün qızıl standart oldu

1958 Jones - Sjögren sindromu olan xəstələrin qanında hüceyrə nüvələrinin ekstraktlarını çökdürməyə qadir olan bir amil aşkar etdi və bu, antinüvə antikorlarının əksər növlərinin təsvirinə təkan verdi.

Hep2 davamlı hüceyrə xəttində dolayı immunofluoressensiya

ANF-nin aşkarlanması metodu Tan (1982) tərəfindən işlənib hazırlanmışdır, o, insan davamlı epitelioid hüceyrə xətti HEp-2 (ATCC ref. no. CCL-23) substrat kimi istifadə etmişdir. İnsan qırtlaq adenokarsinomasından əldə edilən bu hüceyrə xətti plastik və şüşə üzərində monolayer əmələ gətirən iri poliploid keratinləşdirici olmayan skuamöz epitel hüceyrəsidir.

Şəkil: hematoloji boya ilə boyanmış HEp-2 hüceyrə xəttinin hüceyrələri.

Bu xəttin müqayisəli iddiasızlığı, böyük nüvələr və bütün insan antigenlərinin olması davamlı hüceyrə xətti HEp-2 istifadə edərək dolayı immunofluoressensiya metodunu ANF-nin aşkarlanması üçün əsas üsul etdi. İngilis dilli ədəbiyyatda bu metodun vahid adı yoxdur, bəzən bu üsul qısalıq üçün FANA (Fluorescent AntiNuclear Antibody aşkarlanması) adlanır. Nomenklaturada birliyin olmaması laboratoriya testlərinin adlarında çaşqınlığa səbəb olub. Bəzən "antinnüvə antikorları" termini immunoloji laboratoriyalar tərəfindən ferment immunoassay və immunokimyəvi analiz metodlarına, həmçinin immunofluoressensiya metoduna əsaslanan testlərə istinad etmək üçün istifadə olunur. Rusdilli ədəbiyyatda immunofluoresan metodu ANA aşkar etmək üçün digər testlərdən fərqləndirmək üçün bu göstəricinin yerli adının - "antinuclear amil" (ANF) saxlanmasını zəruri hesab edirik.

IgG sinifinin ANF-ni müəyyən etmək lazımdır, çünki immunoqlobulinlərin digər sinifləri ilə təmsil olunan ANF-nin aşkarlanması müstəqil diaqnostik dəyərə malik deyildir. Xəstənin serumunun standart seyreltmələri toxuma substratı ilə inkubasiya edilir, bu da xəstənin serumundan antinüvə antikorlarının müvafiq nüvə hədəflərinə bağlanmasına imkan verir. Daha sonra flüoresan etiketli anti-insan antiserumundan istifadə edərək otoantikor bağlama yerləri aşkar edilir.

Digər insan hüceyrə xətləri substrat kimi istifadə oluna bilsə də, onların yaxşı morfologiyasına və becərilməsi asanlığına görə, Hep-2 dolayı immunofluoressensiya üçün ümumi qəbul edilmiş substrata çevrilmişdir. Onun istifadəsi xəstənin serumunun əhəmiyyətli dərəcədə seyreltilməsi ilə belə parlaq flüoresan sayəsində testin həssaslığını yaxşılaşdırır və böyük, euxromatinlə zəngin nüvə flüoresans növünün dəqiq təsvirinə imkan verir. Bundan əlavə, Hep-2 hüceyrə xəttinin istifadəsi Ro/SS-A antikorlarının, eləcə də laboratoriya heyvan toxumasının kriozeksiyalarından istifadə edərkən zəif olan nüvə antigenlərinə qarşı anticisimlərin aşkarlanmasını asanlaşdırır. HEp-2-nin digər üstünlüklərinə hüceyrə bölünməsinin yüksək tezliyi daxildir ki, bu da yalnız hüceyrə bölünməsi zamanı ifadə olunan antigenlərə qarşı antikorları aşkar etməyə imkan verir və toxuma hüceyrə matrisinin olmaması histoloji ilə müqayisədə xüsusi lüminessensiyanı görməyi çətinləşdirir. bölmələr.

Antinüvə amil titrləri

ANF ​​titri hüceyrə nüvələrinin aydın flüoresansına malik olan xəstənin serumunun son qatılaşması kimi müəyyən edilir. Laborator heyvan toxumalarından istifadə edərkən diaqnostik ANF titri 1:8-1:10, HEp-2 hüceyrə xəttini istifadə edərkən isə 1:80 ilkin titrdən istifadə etmək tövsiyə olunur. Bu halda, normal ANF titrləri 1:160-dan azdır.

Titrləri 1:160-dan az istifadə edərkən, klinik cəhətdən sağlam şəxslərdə zəif müsbət nəticələrin tezliyi 5%-dən çox olmayacaq və eyni zamanda diffuz birləşdirici toxuma xəstəlikləri olan xəstələrdə əhəmiyyətli ANA titrlərinin buraxılmasına imkan verməyəcək.

Son titri müəyyən etmək üçün adətən x2 addımlarla titrləmədən istifadə olunur (1:160-1:320 - 1:640 - 1:1280 - 1:2560 - 1:5120 və s. Daha kobud titrləmə də istifadə edilə bilər. Fonda revmatik xəstəliklərin kəskinləşməsi zamanı adətən 1:640-dan çox ANF titrləri müşahidə olunur və remissiya zamanı titrlər 1:160-1:320-ə qədər azalır.

“Xaçlarda” məzmunu göstərən ANF-nin müəyyənləşdirilməsinin nəticələrini qiymətləndirmək üçün tövsiyələr var. Bu, laboratoriyalara reagentlərə qənaət etməyə və tədqiqat üçün əmək xərclərini azaltmağa imkan verir. Bu halda, son titri təyin etmək mümkün deyil. Nəzərə almaq lazımdır ki, son titr substrata bağlanan otoantikorların miqdarından daha vacibdir, çünki bu, onların antigenlə qarşılıqlı əlaqəsinin yaxınlığı ilə birbaşa bağlıdır. Bütün müsbət xəstələrdə yekun titrin təyin edilməsi məqsədəuyğundur ki, bu da zərdabda prosesin fəaliyyəti ilə daha sıx əlaqəli olan yüksək yaxınlıqlı otoantikorların mövcudluğunu aydınlaşdırmağa imkan verir.

Antinüvə amil nüvəsinin lüminesans növü

Artıq laboratoriya toxumalarının krioseksiyası ilə ANF-nin aşkarlanması üçün dolayı immunofluoresansın klinik istifadəsinin ilk təcrübəsində qeyd edilmişdir ki, otoimmün xəstəlikləri olan xəstələrin zərdabında hüceyrə nüvələrini fərqli şəkildə “ləkələyir” və bu, bəzi nüvə strukturlarının selektiv lüminesansına səbəb olur. Bu fenomenin aydınlaşdırılması, immunofluoressensiya testində nüvənin sözdə "lüminesans növləri" nin təsvirinə səbəb oldu. Bu, hər bir ANA növünün spesifik hüceyrə hədəflərinin olması ilə əlaqədardır ki, bunun nəticəsində hüceyrənin nüvəsinin, nüvəsinin və sitoplazmasının lüminesans növü xəstənin zərdabında ANA-nın daxilindəki antigen tərkibli strukturlarla qarşılıqlı təsirini əks etdirir. hüceyrə. Lüminesansın növü xəstənin qan serumunda spesifik otoantikorların mövcudluğundan asılıdır, bunun əsasında bu serumda mövcud olan ANA növləri ilə bağlı ilkin nəticəyə gəlmək olar. Bununla belə, laboratoriya heyvanlarının toxumalarının histoloji hissələrinin istifadəsi lüminesans növünü etibarlı şəkildə təyin etməyə imkan vermir. Eyni zamanda, Hep-2 kimi davamlı hüceyrə xətlərinin istifadəsi nüvə və sitoplazmik boyanmanın əhəmiyyətli sayda variantını təsvir etməyə imkan verir. Antigenlərin üç əsas qrupu var, antikorların olması müxtəlif növ lüminesansları təyin edir:

Hüceyrə nüvəsinin lüminesans növü ANF-nin müəyyən edilməsinin məlumat məzmununu əhəmiyyətli dərəcədə artırır və buna görə də bu göstəricini təyin edərkən müntəzəm olaraq müəyyən edilməlidir. HEp-2 hüceyrələrinin istifadəsi tədqiq olunan zərdabda mövcud olan ANA-ların spektrindən asılı olan nüvə boyanmasının 20-dən çox müxtəlif variantını xarakterizə etməyə imkan verir. Bununla belə, praktiki laboratoriya üçün otoantikorların antigen tərkibli hüceyrə strukturlarına bağlanmasının 6 əsas variantını ayırmaq kifayətdir.

Nüvə lüminessensiyasının homojen, periferik, dənəvər (kiçik/böyük), nüvəli, sentromerik və sitoplazmik növləri vardır. Hər bir lüminesans növü bir variantı digərindən ayırmağa imkan verən çox xarakterik xüsusiyyətlərə, həmçinin xəstələrin serasında otoantikorların reaksiya verdiyi bir sıra antigenlərə malikdir. Lüminesans növlərinin təsviri özlüyündə qiymətli klinik məlumat verir, əlavə olaraq, luminescence növü gələcəkdə müəyyən laboratoriya testlərinə ehtiyac olduğunu göstərə bilər.

At homojen tip parıltı otoantikorlar nüvədə diffuz şəkildə yayılan antigenlərlə reaksiya verir, yəni. xromatinin bir hissəsidir. Tipik olaraq, homojen bir növ lüminesans aşkar edildikdə, kondensasiya olunmuş xromosomlar bölünən hüceyrələrdə parlaq rəngə malikdir. Xromatinin əsas struktur vahidləri nukleosomlardır - DNT və histon kompleksləri. Beləliklə, homogen tipli lüminesans nukleosomlara, dsDNA-ya və histonlara qarşı antikorlara qarşı antikorların mövcudluğunu göstərir. Bu, SLE və narkotik səbəb olan lupus olan xəstələrdə, həmçinin skleroderması olan xəstələrdə baş verir. Tipik olaraq, homogen tipli lüminesans ilə ANF-nin yüksək titrinin aşkarlanması SLE diaqnozunu göstərir.

Periferik tip parıltı tez-tez ayrıca təcrid olunur, baxmayaraq ki, bu, homojen parıltı növüdür. Onun aşkarlanması hüceyrə fiksasiyasının artefaktıdır ki, bu da nüvədə xromatinin periferiyaya yenidən paylanmasına gətirib çıxarır. Otoimmün qaraciyər xəstəliklərində müşahidə olunan lüminesansın periferik tipini nüvə membranının boyanmasından ayırmaq vacibdir. Lüminesansın periferik növü ikiqat zəncirli DNT-yə antikorları olan xəstələrdə aşkar edilir və əsasən SLE olan xəstələrdə aşkar edilir.

Qranul tip ən ümumi və eyni zamanda, ən qeyri-spesifikdir. Bəzən rus ədəbiyyatında bu cür parıltı "xallı" və ya "tor" adlanır. "Qranulyar" adı bu fenomeni daha dəqiq əks etdirir, çünki bu vəziyyətdə autoantikorlar supramolekulyar nukleoprotein kompleksləri olan nüvədəki qranullarla reaksiya verir. Zülalların və nuklein turşularının belə kompleksləri nüvədə hüceyrənin normal fəaliyyəti üçün zəruri olan bir sıra funksiyaları yerinə yetirir. Bu cür komplekslərə, xüsusən də ribosomlarda zülal sintezi üçün zəruri olan mRNT-nin transkripsiyadan sonrakı yenidən qurulmasını həyata keçirən spliceosomlar daxildir. Tərkibində çoxlu müxtəlif nukleoproteinlər var ki, bu da dənəvər növ lüminesans aşkar edərkən antigenik hədəflərin müxtəlifliyini müəyyən edir. Lüminesansın dənəvər növünün vizuallaşdırılmasına səbəb olan antikorların əsas autoantigenlərinə Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigenləri və PCNA daxildir. Hüceyrələrin bölünməsi prosesində hüceyrələr əmələ gələn nukleoprotein komplekslərinin çoxunu itirirlər, buna görə də dənəvər tipli lüminesanslı hüceyrə xəttindəki mitotik fiqurlar boyanmır; Nüvə lüminesansının dənəvər növü SLE, SS, SS, DM/PM, RA və bir sıra digər autoimmun xəstəlikləri olan xəstələrdə müşahidə olunur. Sistemik xəstəlik əlamətləri olmayan ANF olan klinik cəhətdən sağlam şəxslərin qan serasında dənəvər tipli ANF-nin aşağı titrləri üstünlük təşkil edir.

Çox yüksək ANF titrlərinin (1:2560-1:10000) aşkarlanması qaba dənəvər tip nüvə lüminesans adətən qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyinin diaqnozunu göstərir və bu xəstəliyin əsas seroloji markeri olan RNP antigenini müəyyən etmək üçün əlavə müayinə tələb edir.

Nüvə antigenləri ANA-nın hədəfi kimi çıxış edə bilər ki, bu da aşkarlanmasına səbəb olur nüvə növü flüoresan. Nüvə tipli parıltının müəyyən edilməsi skleroderma və onun növləri üçün xarakterikdir. Nüvə növü flüoresan RNT polimeraza 1, NOR, U 3 RNP, PM/Scl kimi nüvənin komponentlərinə qarşı antikorları olan xəstələrdə müəyyən edilir.

Sentromerik tip fluoressensiya antikorlar xromosomların sentromerlərinə göründükdə qeyd olunur və yalnız bölünən hüceyrələrdə olur. Onun olması sklerodermanın CREST variantı üçün xarakterikdir.

Sitoplazma növü parıltı tRNA sintetazalarına, xüsusən də polimiyozitdə müşahidə olunan Jo-1-ə qarşı antikorları göstərir. Bundan əlavə, hüceyrə sitoplazmasının digər komponentlərinə qarşı yönəlmiş ANA olan xəstələrdə aşkar edilir: otoimmün hepatitdə aktinə qarşı anticisimlər, birincili biliar sirozda mitoxondriyaya qarşı anticisimlər.

Lüminesansın bir sıra digər növlərini xarakterizə etmək olar və hüceyrə nüvəsinin bu cür boyanması ANA-nın müəyyən bir növü üçün xarakterik ola bilər. Beləliklə, HEp-20 hüceyrələrində immunofluoressensiya testində Scl-70-ə qarşı antikorlar nüvənin və nüvələrin incə dənəli boyanmasını, anti-p80 - nüvədə mitotik hüceyrələrdə olmayan işıqlı nöqtələri verir. Bununla belə, belə hadisələrin nadirliyini və müxtəlifliyini qeyd etmək lazımdır ki, bu da onların adi tədqiqatlar zamanı identifikasiyasını lazımsız edir.

Bir neçə növ lüminesansın birləşməsi tez-tez baş verə bilər, məsələn, Scl-70-ə qarşı antikorlar üçün xarakterik olan incə dənəvər və nüvəli. Üstəlik, tez-tez aşağı seyreltmələrdə bir növ flüoresans üstünlük təşkil edir, məsələn, dənəvər və sonrakı seyreltmələrlə homogen və ya sentromerik floresans növləri aşkar edilir ki, bu da xəstənin zərdabında müxtəlif növ ANA-nın olduğunu göstərir. Parıltı növü həkimə müəyyən bir diaqnozun lehinə müəyyən məlumatlar təqdim etsə də, onun nisbətən aşağı spesifikliyini və əlavə laboratoriya müayinəsini tələb edən qarşılaşılan hadisələrin müxtəlifliyini nəzərə almaq lazımdır.

ANA-nın aşkarlanması xəstələrin qanında ANA spektrini aydınlaşdıran digər laboratoriya testlərinin istifadəsi üçün əsasdır. Bu testin həddindən artıq məlumat məzmununu nəzərə alaraq, sonrakı müayinənin nəticələrinin sonrakı sınaqları və təhlili lüminesans növünün və ANF titrinin qiymətləndirilməsinin nəticələrindən asılı olaraq şərh edilməlidir.

Əhəmiyyətli ANA titrlərinin olmaması, demək olar ki, həmişə aktiv sistemli revmatik xəstəliyin diaqnozunu istisna etsə də, HEp-2 hüceyrə xəttini istifadə edərkən, SLE diaqnozu üçün meyarlara cavab verən xəstələrin 2-4% -ində ANA aşkar edilmir və ya titrlər aşağı. Bu xəstələr bəzən " ANF-mənfi SLE“Belə xəstələrdə diaqnozu aydınlaşdırmaq üçün əlavə müayinə, ilk növbədə SS-A antigenlərinə qarşı anticisimlərin müəyyən edilməsi tələb olunur. Bu antigenlər yüksək dərəcədə həll olunur və hüceyrə nüvələrindən itirilə bilər. Xəstələrin bu kateqoriyasını azaltmaq üçün, ekstraksiya edilmiş nüvə antigenlərinə antikorların təyini daxil olmaqla, kompleks testlərdən istifadə olunur. birləşdirici toxuma xəstəlikləri üçün skrininq», test 000723. Belə bir müayinənin mənfi nəticəsi, çox yüksək ehtimalla, SLE və digər sistemli revmatik xəstəliklərin diaqnozunu istisna etməyə imkan verir.

Sistemik birləşdirici toxuma xəstəliklərinin markerlərindən biri olan antinükleer antikorları aşkar etməyə imkan verən insan epitel hüceyrələrinin HEp-2 istifadə edərək tədqiqat üsulu.

Rus dilinin sinonimləri

ANF, antinüvə antikorları, antinüvə antikorları (ANA).

İngilis sinonimləri

Antinüvə Antikorları (ANA), Hep-2 Substrat, ANA-Hep2, Floresan AntiNüvə Anticisimlərinin aşkarlanması (FANA).

Tədqiqat metodu

Dolayı immunofluoressensiya reaksiyası.

Tədqiqat üçün hansı biomaterial istifadə edilə bilər?

Venöz qan.

Tədqiqata necə düzgün hazırlaşmaq olar?

Qan vermədən əvvəl 30 dəqiqə siqaret çəkməyin.

Tədqiqat haqqında ümumi məlumat

Antinüvə amilinin (ANF) təyini antinüvə anticisimlərinin (ANA) aşkarlanması və otoimmün xəstəliklərin diaqnostikası üçün “qızıl standart”dır.

Sistemli birləşdirici toxuma xəstəliklərinin (SCTD) patogenezi immunitet sistemindəki pozğunluqlar və öz hüceyrələrinin strukturlarına qarşı antikorların istehsalının artması ilə sıx bağlıdır. Hüceyrə nüvəsinin komponentlərinə avtoantikorlar - antinüvə antikorları - nuklein turşuları və nüvə zülalları, sitoplazmik antigenlərlə qarşılıqlı əlaqədə olur ki, bu da toxuma və orqanlarda iltihablı dəyişikliklər, oynaqlarda və əzələlərdə ağrı, şiddətli yorğunluq, çəki itirmə, dəri dəyişiklikləri ilə özünü göstərir. ANAlar bir çox otoimmün xəstəliklərdə rast gəlinir, lakin daha çox sistemik lupus eritematosusda (SLE) rast gəlinir. ANA-lar birləşdirici toxuma sistemli xəstəlikləri olan xəstələrin 90% -dən çoxunda baş verir;

ANF-ni dolayı flüoresansla təyin edərkən, insan qırtlaq adenokarsinoması HEp-2 epitel hüceyrələrinin davamlı xətti ən çox istifadə olunur. HEp-2 hüceyrələri laboratoriya tədqiqatları üçün çox əlverişli substratdır, çünki onlar böyük nüvələrə malikdirlər və şüşə slaydlarda bir təbəqədə böyüyürlər. ANA-lar HEp-2 hüceyrələrinin hüceyrədaxili antigenlərinə bağlanmaqla aşkar edilir.

Tədqiqat zamanı HEp-2 epitel hüceyrələri şüşə slaydlarda yetişdirilir, sabitlənir və seyreltilmiş xəstə serumu ilə inkubasiya edilir. Həddindən artıq zərdab çıxarıldıqdan sonra hüceyrələr flüoresan etiketli antikorlarla inkubasiya edilir, sonra yenidən yuyulur və flüoresan mikroskop altında araşdırılır. Bu halda, antikor titri və parıltı növü müəyyən edilir. 1:160-dan yuxarı titr diaqnostik baxımdan əhəmiyyətli hesab olunur. Revmatik xəstəliklərin kəskinləşməsi zamanı 1:640-ı keçir, remissiya zamanı isə 1:160-1:320-yə qədər azalır. Nə qədər çox antikor varsa, titri bir o qədər yüksəkdir. Parıltının növünə əsasən, böyük klinik əhəmiyyətə malik olan və xəstənin sonrakı müayinəsi üçün taktikanı təyin edən antinüvə antikorlarının hədəflərini müəyyən etmək mümkündür. Əsas olanları periferik, dənəvər (kiçik/böyük), nüvəli, sentromerik və sitoplazmik nüvə boyanma növləridir. Hər bir parıltı növü bir variantı digərindən ayırmağa imkan verən çox xarakterik xüsusiyyətlərə malikdir.

Homojen (diffuz) boyanma ikiqat zəncirli DNT-yə, histonlara qarşı anticisimlərin olması ilə əlaqədardır və SLE və dərmanların yaratdığı lupus üçün xarakterikdir.

Periferik lüminessensiya nüvədə xromatinin periferik paylanması nəticəsində yaranır, DNT-yə antikorlarla əlaqələndirilir və SLE üçün spesifikdir. Bu növ lüminesansın otoimmün qaraciyər xəstəliklərində baş verən nüvə membranının boyanmasından fərqləndirmək vacibdir.

Qranulyar (xallı, retikulyar) boyama ən çox rast gəlinən və ən az spesifik olan bir çox otoimmün xəstəliklərdə aşkar edilir; Bu vəziyyətdə autoantigenlər nüvədəki nukleoprotein kompleksləridir (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B antigenləri və PCNA).

Kobud dənəvər tipli lüminesans ilə ANF-nin çox yüksək titrləri çox vaxt qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyini göstərir.

Nüvə (nükleolar) boyanma, skleroderma, Sjögren xəstəliyi zamanı aşkar edilən nüvənin komponentlərinə (RNT polimeraza-1, NOR, U 3 RNP, PM/Scl) antikor əmələ gəlməsi nəticəsində yaranır. ANA bəzən endokrin xəstəliklərdə (1-ci tip şəkərli diabet, tiroidit, tireotoksikoz, poliendokrin sindrom), dəri xəstəliklərində (psoriaz, pemfiqus), hamiləlik dövründə, orqan və toxuma transplantasiyasından sonra, hemodializdə olan xəstələrdə artır.

Centromere lüminesansı xromosomların sentromerlərinə antikorların iştirakı ilə görünür və sklerodermanın bir forması - CREST sindromu üçün xarakterikdir.

Lüminesansın sitoplazmik növü tRNT sintetaza, xüsusən də dermatomiyozit və polimiyozit üçün xarakterik olan Jo-1-ə qarşı antikorlarla əlaqələndirilir. Bu növ boyanma otoimmün hepatit və birincili biliar sirozda sitoplazmanın digər komponentlərinə qarşı antikorların olması ilə də müəyyən edilir.

Müxtəlif növ lüminesansların eyni vaxtda aşkarlanması müxtəlif növ antikorların mövcudluğunu göstərir.

Sağlam fərdlərdə ANA-nın aşağı, orta və ya yüksək titrlərində xırda dənəli lüminesans aşkar edilə bilər, lakin adətən qaba dənəli və ya homojen növlü lüminesans aşkar edilməməlidir.

Parıltı növünün qiymətləndirilməsinin nəticələrindən asılı olaraq, xəstə üçün əlavə müalicə taktikası hazırlanır və ANA spektrini aydınlaşdırmaq üçün əlavə tədqiqatlar təyin edilir.

Tədqiqat nə üçün istifadə olunur?

• Sistemli birləşdirici toxuma xəstəliklərinin diaqnostikası üçün.
• Revmatik xəstəliklərin differensial diaqnostikası üçün.
• Otoimmün xəstəliklər üçün terapiyanın effektivliyini qiymətləndirmək.
• Sistemik birləşdirici toxuma xəstəliklərinin gedişatını izləmək.

Tədqiqat nə vaxt təyin olunur?

• Otoimmün xəstəliyin əlamətləri üçün (uzun müddət davam edən qızdırma, oynaq ağrısı, yorğunluq, kilo itkisi, dəri dəyişiklikləri).
• Sistemik birləşdirici toxuma xəstəliklərinə xas olan dəyişiklikləri müəyyən edərkən (artan ESR, C-reaktiv zülalın səviyyəsi, dövran edən immun kompleksləri).

Nəticələr nə deməkdir?

İstinad dəyərləri

Nəticə: mənfi.

Başlıq: 1:160.

HEp-2 hüceyrələrində ANF titrinin artmasının səbəbləri:

• sistemik lupus eritematosus (95% hallarda),
• dermatomiyozit/polimiyozit,
• sistemli skleroderma (60-90% hallarda),
• Sjogren sindromu (40-70% hallarda)
• qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyi (Sharpe sindromu),
• Raynaud sindromu,
• diskoid lupus,
• narkotik səbəb olan lupus,
• romatoid artrit,
• nekrotizan vaskulit,
• yoluxucu mononükleoz,
• leykemiya,
• bədxassəli neoplazmalar (əsasən lenfoma),
• miyasteniya gravis,
• yoluxucu endokardit,
• xroniki otoimmün hepatit,
• qaraciyərin birincili biliyer sirozu,
• vərəm,
• pnevmokonioz,
• ağciyərlərin interstisial fibrozu.

Parıltı növləri

Parıltı növü	Nə üçün xarakterikdir?
Homojen	SLE, dərmanla əlaqəli lupus, sistemik skleroderma, xroniki aktiv hepatit üçün
Periferik
dənəvər	SLE, Sjögren sindromu, qarışıq birləşdirici toxuma xəstəliyi, revmatoid artrit üçün
Nüvəli	Polimiyozit/dermatomiyozit, skleroderma, Sjögren sindromu, SLE üçün
Sentromerik	CREST sindromu üçün (dəri kalsinozu, Raynaud sindromu, özofagus disfunksiyası, sklerodaktiliya, telangiektaziya)
Sitoplazmik	Dermatomiyozit/polimiyozit, otoimmün qaraciyər xəstəliyi, birincili biliyar siroz üçün

Nəticəyə nə təsir edə bilər?

• Yanlış müsbət nəticəyə səbəb olur:

• • 60-65 yaşdan yuxarı yaş (10-37% hallarda);
  • narkotik səbəb olan lupusa səbəb ola bilən dərmanların istifadəsi (asetazolamid, karbidopa, xlorotiyazid, xlorpromazin, klofibrat, etosuksimid, qızıl duzları, griseofulvin, hidralazin, izoniazid, litium duzları, metildopa, oral kontraseptivlər, pro de , propilurasil, quinidin, reserpin, streptomisin, sulfanilamid, tetrasiklin, tiazid diuretikləri).

• Qlükokortikosteroidlərin (prednizolon, deksametazon, metipred) qəbulu bəzən yanlış mənfi nəticəyə gətirib çıxarır.

Vacib Qeydlər

• SLE hallarının 5% -ində bu testin mənfi nəticəsi mümkündür (ANF-mənfi SLE). Belə vəziyyətlərdə diaqnozu aydınlaşdırmaq üçün SS antigenlərinə (Ro) antikorları təyin etmək lazımdır.
• Müsbət bir test nəticəsi otoimmün xəstəliyin mütləq sübutu deyil. Sağlam insanlarda 3-13% hallarda ANF titri artır və 1:320-ə çatır.
• Test nəticələri klinik məlumatlar və digər laboratoriya parametrləri ilə birlikdə qiymətləndirilməlidir.
• Testin nəticəsi müsbət olarsa, immunoblotinq yolu ilə ANA-nın spesifikliyini müəyyən etmək tövsiyə olunur.

• Anti-cüt zəncirli DNT antikorları (anti-dsDNA), skrininq
• Nüvə antigenlərinə (ANA) antikorlar, skrininq
• Çıxarılan nüvə antigeninə qarşı antikorlar (ENA ekranı)
• Kardiolipin, IgG və IgM-yə qarşı antikorlar
• Antinüvə anticisimləri (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, histonlar, nukleosomlar, Ribo P, AMA-M2), immunoblot